ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ.

1. Бывают культуры возрастающих тканей и переживающих тканей (утративших способность к росту), которые выращивают в водянистой среде либо с плотным покрытием.

2. Зависимо от техники производства есть три главных типа возрастающих тканевых культур:

а) однослойныетканевые культуры – клеточки прикрепляются и вырастают в виде сплошного монослоя, стелющегося по поверхности стекла лабораторной посуды;

б) культуры суспензированных клеток – клеточки вырастают ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. и плодятся во взвешенном состоянии при насыщенном смешивании среды; их употребляют для огромного скопления вирусов;

в) органные культуры либо культуры фиксированных кусочков - куски органов животных и человека, выращиваемых вне организма и сохраняющие характерную им структуру.

3. Однослойные культуры – главные культуры, применяемые в современной лабораторной и производственной вирусологической практике. По ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. числу жизнестойких генераций они разделяются на:

а) первичные (первично-трипсинизированные) – клеточки этой культуры употребляются в течение одной генерации, т.е. всякий раз нужно вновь получать культуру ткани; культуру готовят методом измельчения ткани, разъединения клеток при обработке тканей трипсином, отмывания приобретенной однородной суспензии изолированных клеток от трипсина с следующим суспендированием клеток в питательной ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. среде, обеспечивающей их размножение; при оседании клеточки ткани просто и достаточно крепко прикрепляются к стене пробирки либо флакона, на которой вырастают и распространяются в виде монослоя; в большинстве случаев употребляют эмбриональные ткани (клеточки типа фибробластов, почечная ткань зародыша человека и обезьян, амниона человека, фибробласты куриного зародыша, зародыша ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. мыши), также ткани взрослого человека обычного либо опухолевого происхождения;

б) перевиваемые – эти культуры можно поддерживать методом непрерывных перевивок, т.к. клеточки отлично приспособлены к условиям неизменного существования in vitro; их готовят из линий клеток, которые отлично плодятся в течение многих лет; в большинстве случаев эти культуры получают из опухолевых клеток. Получено около ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. 200 штаммов таких клеток: штамм L (из культуры мышиных фибробластов), штамм HeLa (из карциномы шеи матки), штамм Hep-3 (из лимфоидной карциномы) и т.д. Работа по получению этих культур наименее трудоемка, клеточки их схожи и размеренны в собственных свойствах; они способны плодиться в течение долгого срока в лабораторных критериях и ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. сохранять свои характеристики в замороженном состоянии (t° = -70° C) в течение многих лет;

Первичные и перевиваемые полосы клеточных культур могут быть контаминированы микоплазмами и неведомыми вирусами, посреди которых встречаются онкогенные (вирус SV40 в культуре почечных клеток обезьян). Возможность внесения в человеческий организм вкупе с вакциной онкогенных вирусов резко ограничивает ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. внедрение перевиваемых линий клеточных культур в производстве вирусных вакцин и просит проведения соответственных контролей.

в) полуперевиваемые – клеточки этих культур способны плодиться в течение 50 пассажей (перевивок), сохраняя начальный диплоидный набор, обычный для соматических клеток применяемых тканей; для их изготовления употребляют диплоидные клеточки человека (фибробласты людского зародыша, диплоидные клеточки легких человека). Диплоидные клеточки ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. не претерпевают злокачественного перерождения и этим прибыльно отличаются от опухолевых; они отыскали обширное применение в вирусологии, в особенности в производстве вакцин.

3. Для выкармливания клеточных культур нужны клеточные среды сложного состава (минеральные соли, глюкоза, аминокислоты, витамины, кофакторы; заносят сыворотку крови и буферные смеси, лекарства для предотвращения бактериального загрязнения). К ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. ним относятся среда 199, среда Игла, среда Тироде.

4. Все работы с культурами клеток требуют строжайшего соблюдения правил асептики во избежание заноса в их разных микробов из среды. Для предотвращения загрязнения культуры бактериальной флорой к ней добавляют лекарства (пенициллин, стрептомицин).

5. После получения монослоя жизнестойкой культуры клеток, которая начинает расти и плодиться, и исследования ее под микроскопом ТКАНЕВЫЕ КУЛЬТУРЫ ДЛЯ КУЛЬТИВИРОВАНИЯ ВИРУСОВ. (´8) культуру заражают 1 мл вируссодержащего материала. Пробирку закрывают стерильной резиновой пробкой и в наклонном положении помещают в термостат при 37° С на 5-7 суток.


tmk117-podbiraet-kartochki-6-elementnogo-bukvennogo-loto-k-bukvam-na-bolshoj-karte.html
tmvr-rezerv-test-uroven-1.html
tmzh41-rassmatrivaet-knigu-vmeste-so-vzroslim.html